1kb Ladder DNA Marker

产品名称
1kb Ladder
货号规格
M1181/50次,,,,,M1182/50次×5
产品说明
1kb Ladder是由10条双链线状DNA片断混淆而成的DNA分子量标准(DNA Marker/ DNA Ladder),,,,,适用于确定500 bp至10 kb的线性双链DNA片断大。。。。,,,指示带为2000 bp和5000 bp,,,,,便于电泳后视察。。。。每条带都通过严酷的物理定量可用于测定目的片断的巨细和含量。。。。
产品浓度为104 ng/?l。。。。
条带组成(bp)
500、1,000、1,500、2,000、3,000、4,000、5,000、6,000、8,000、10,000
建议上样量
3-5 ?l/次。。。?????善局ど涎拙尴秆≡窈鲜噬涎。。。。
1kb ladder已预混上样缓冲液,,,,,可直接举行电泳剖析。。。。
建议电泳条件
8 cm 1%琼脂糖凝胶,,,,,
1×TAE,,,,,7 V/cm,,,,,45 min。。。。
生涯条件
常温生涯半年,,,,,恒久生涯请置于-20℃。。。。
各条带含量
指示带 100 ng/5?l
非指示带 40 ng/5?l


● 关于非变性凝胶电泳,,,,,Marker是否需要DNA变性?
答:本公司Marker产品中只有Lambda DNA Marker为质粒酶切产品,,,,,在电泳上样前如加热处置惩罚可获得最佳效果,,,,,其余产品均不需点样前加热处置惩罚;;;;;另外电压太高也会使凝胶过热和DNA变性造成带型异常。。。。
● 当DNA停留在凝胶点样孔处时该怎么办?????
答:检查胶浓度是否在适合疏散DNA片断的规模,,,,,点样孔是否高质,,,,,确保电泳的正负极准确,,,,,检查电泳缓冲液是否具有缓冲能力,,,,,确保DNA样品的纯度,,,,,如举行PCR产品的纯化,,,,,确保样本中没有或只保存少量的DNA连系卵白或其他可与DNA连系的化合物。。。。
● 为什么DNA条带不睬想?????
答:影响电泳条带的因素许多,,,,,如凝胶种类或浓度不对适,,,,,质量不佳;;;;;上样量过多或过少;;;;;样本的纯度不高,,,,,盐浓度过高;;;;;电泳缓冲液缓冲能力缺乏,,,,,有核酸酶污染;;;;;电泳条件不准确;;;;;染色不充分或不匀称;;;;;跑胶后没有实时照相。。。。
● 为什么定量数据不准确以及怎样准确定量样品?????
答:样品和Marker的上样条件差别,,,,,参考条带不准确,,,,,凝胶的不匀称染色或配景过高都会滋扰凝胶定量效果。。。。样品DNA和Marker DNA在电泳前选用相同的上样染料处置惩罚,,,,,调解样品浓度,,,,,使其在凝胶中的含量与分子量最靠近标准DNA条带,,,,,样品DNA和Marker的上样体积只管靠近,,,,,样品用1×上样缓冲液稀释;;;;;定量时以分子量最靠近的标准条带为参照物,,,,,剖析样品条带的含量;;;;;使用凝胶图像剖析软件,,,,,如SensiAnsys可对DNA举行准确定量,,,,,比目测条带要领更准确。。。。
● 为什么在变性聚丙烯酰胺/尿素凝胶里电泳时会泛起杂带?????
答:一样平常来说,,,,,双链DNA Marker不推荐用于变性电泳,,,,,不然会爆发非正常带型,,,,,即泛起所谓的杂带。。。。这种泛起异型带的征象,,,,,在100 bp以下的条带极易爆发。。。。当您的实验不可阻止的要使用变性聚丙烯酰胺/尿素凝胶举行电泳时,,,,,我们建议,,,,,将样品和Marker选用同样的变性上样缓冲液举行变性处置惩罚后上样,,,,,以消除二级结构。。。。