FS Mix Direct for Blood(P2071a-P2072a)

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FS Mix Direct for Blood(P2071a-P2072a)

价钱：￥260.00~1140.00

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货号：

P2071a(1 ml（40次，，，，，50 μl系统/次）) P2072a(1 mlx5（200次，，，，，50 μl系统/次）

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FS? Mix Direct for Blood

Cat. #：P2071a，，，，，P2072a

产品简介

FS? Mix Direct for Blood是适合全血模板扩增的2×浓缩快速高效PCR预混淆溶液，，，，，含有FS? Taq DNA聚合酶、dNTP混淆物、缓冲液等PCR扩增必需组分（模板与引物除外）。。使用时，，，，，仅需在扩增系统中加入模板和引物即可举行PCR，，，，，从而可以极大地简化操作历程，，，，，缩短操作时间，，，，，降低污染（加样次数镌汰）。。FS? Mix Direct for Blood的反应系统经由优化处置惩罚，，，，，高迅速度的FS? Taq DNA聚合酶确保处置惩罚液中的微量样本获得高效扩增。。本产品不必举行繁琐的DNA提取！，，，，，最大限度镌汰实验误差和交织污染；；；；；同时依赖特殊的缓冲系统增强PCR扩增的特异性，，，，，包管扩增效果与DNA模板扩增效果同样可靠。。

FS? Taq DNA聚合酶是凭证卵白工程原理，，，，，以Taq DNA聚合酶为基础！，，，，，研发设计的新一代DNA聚合酶。。本产品具有类似KOD酶的快速扩增能力，，，，，延伸速率为20s/kb（70~75℃，，，，，简朴模板可达5s/kb）。。是通俗Taq DNA聚合酶的3倍，，，，，可缩短一半以上的扩增时间；；；；；同时具备Taq DNA聚合酶扩增效率高、顺应性广等优点。。FS? Taq DNA聚合酶使用要领与通俗Taq DNA聚合酶基内情同，，，，，只需注重适当缩短延伸时间。。该酶具有5'→3'聚合酶活性，，，，，无3'→5'外切酶活性。。扩增产品具有3'-dA突出端，，，，，可直接用于TA克隆。。

产品组成

Component	P2071a	P2072a
2× FS? Mix Direct for Blood	1 ml	1 ml× 5
超纯水	1 ml	1 ml× 5

本产品分系统中包括溴酚蓝、不含溴酚蓝两类。。系统中包括溴酚蓝的产品，，，，，PCR扩增产品可直接电泳检测。。这两类产品的扩增性能无差别。。如无特殊说明提供系统中包括溴酚蓝的包装。。

生涯条件

-20℃生涯2年。。

质量控制

纯度检测：经质量检测，，，，，产品不含脱氧核糖核酸内切酶、脱氧核糖核酸外切酶和核糖核酸酶污染。。

功效检测：PCR要领检测无宿主剩余DNA，，，，，能有用扩增人基因组中的单拷贝基因。。

应用举例

1. 配制反应系统

请于冰上设置反应系统，，，，，系统巨细与组分用量与添加顺序可调解：

Ordinal	Component	Volume (50 μl reaction volume)	Final concentration (50 μl reaction volume)
1	2× FS? Mix Direct for Blood	25 μl	1×
2	upstream primer (10 μM)^[1]	2 μl	0.4 μM
3	downstream primer (10 μM)^[1]	2 μl	0.4 μM
4	全血	0.5 μl	<1μg
5	超纯水^[2]	To 25 μl	-
optional	MgCl₂(MgSO₄)/PCR Enhancer^[³^]	Variable	-

[1] 引物终浓度建议规模：0.1-1 μM。。特异性差时可降低浓度，，，，，效率低时可提高浓度。。

[2] 可单独订购超纯水（Cat. #：P9021/P9022/P9023）。。

[3] 可单独订购25mM MgCl₂（Cat. #：P9031）和PCR Enhancer（Cat. #：P9041）。。

2. 设定反应程序举行PCR反应

大大都模板的快速扩增条件：

Stage	Temperature	Time	Number of Cycles
Initial Denaturation	94℃	4 min	1
Denaturation	94℃	30 sec	28-40
Annealing	55-68℃^[1]	30 sec
Extension	72℃	Variable^[2]
Final Extension	72℃	2 min	1

[1] 退火温度应凭证Tm值较低的引物来设。。

[2] 延伸时间按20 sec/kb来设最佳。。

1kb简朴模板的快速扩增条件：

Stage	Temperature	Time	Number of Cycles
Initial Denaturation	95℃	3 min	1
Denaturation	95℃	15 sec	28-40
Annealing	55-68℃	15 sec
Extension	72℃	20 sec
Final Extension	72℃	2 min	1

由于1kb简朴模板的二级结构简朴，，，，，且长度较短，，，，，可同时缩短变性、退火时间至15s，，，，，以实现快速扩增。。

3. 剖析效果

反应产品可直接举行琼脂糖凝胶电泳，，，，，通过凝胶成像装备视察目的条带的扩增情形。。若有需要，，，，，可举行割胶接纳。。无产品或产品量少的刷新步伐有：1调解退火温度；；；；；2镌汰抑制剂的影响，，，，，如提取的基因组DNA中含有抑制扩增的因素，，，，，需要高倍稀释（1: 10000）后使用；；；；；3接纳乙醇沉降洗脱，，，，，提高模板DNA的纯度；；；；；4使用PCR添加剂，，，，，如PCR Enhancer（Cat. #：P9041）、MgCl₂（Cat. #：P9031）等可提高产量。。

操作注重事项

室温下FS? Taq DNA聚合酶有一定的活性，，，，，为阻止爆发非特异性扩增，，，，，请于冰上设置反应系统，，，，，并且最后添加模板DNA。。

本产品可直接重新鲜或冻存的全血、抗凝全血（EDTA或其他抗凝剂）、FTA卡等样本扩增DNA。？？？？？捎糜谌搜蚱渌镅骸！

延伸时间视片断长度而定。。一样平常情形，，，，，≤500bp目的片断延伸15s，，，，，500bp-1kb延伸20s，，，，，＞1kb延伸时间按20s/kb盘算。。

FS? Taq DNA聚合酶具有脱氧核苷酸转移酶活性，，，，，因此在PCR产品3’最后通；；；；；峒由弦桓龆嘤嗟耐蜒跸汆堰屎塑眨，，，，可举行TA克隆。。

FS? Mix Direct for Blood也可接纳通例程序扩增，，，，，扩增产品纯化后可直接用于测序反应。。

为利便加样，，，，，全血可用PBS稀释后加样，，，，，模板用量凭证样本、实验要求而定。。

引物设计注重事项

引物长度一样平常在15-30个碱基之间；；；；；上下游引物3’最后阻止互补，，，，，阻止泛起3个以上重复的G或C，，，，，或泛起发夹结构，，，，，不然会爆发非特异性扩增；；；；；GC含量控制在40-60%，，，，，且上下游引物GC含量只管靠近；；；；；Tm值控制在55-65℃之间，，，，，且上下游引物Tm值只管靠近，，，，，特殊附加序列（酶切位点、修饰等）是非模板匹配序列，，，，，不加入Tm值盘算。。

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名称	货号	规格
PCR Mix	P2011/P2012/P2013/P2014/P2015	1ml/5ml/10ml/50ml/100ml
Power Green qPCR Mix	P2101/P2102/P2103/P2104/P2105	1ml/5ml/10ml/50ml/100ml
1kb ladder	M1181/M1182	50次/250次
DS^TM5000	M1111/M1112	60次/300次
高纯度质粒小提试剂盒	N1011/N1012/N1013	50次/100次/200次
通用RNA提取试剂盒	R1051	50次
基因组DNA快速提取试剂盒	N1111/N1112	50次/100次
DNA凝胶接纳试剂盒	N1071/N1072/N1073	50次/100次/200次
RT-PCR Kit	R1011/R1012	20次/100次