Optimus? Hotstart Taq Mix（P2041-P2042）

产品中心 > 热启动PCR > Optimus? Hotstart Taq Mix（P2041-P2042）

Optimus? Hotstart Taq Mix（P2041-P2042）

价钱：￥150.00~24500.00

配送效劳：

运费￥0.00

货号：

P2041（1ml） P2042（1ml×5） P2043（100ml） P2044（500ml）

数目：

连忙购置加入购物车

产品详细

Optimus? Hotstart Taq Mix

Cat. #：P2041，，，，，P2042，，，，，P2043，，，，，P2044

产品简介

Optimus? Hotstart Taq Mix是2×浓缩的PCR扩增预混和溶液，，，，，含有Hotstart Taq DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等PCR扩增必需组分（模板与引物除外）。。。。使用时，，，，，仅需在扩增系统中加入模板和引物即可举行PCR，，，，，大大简化操作历程，，，，，缩短操作时间，，，，，降低污染（加样次数镌汰）同时，，，，，由于系统内含有增强剂，，，，，能够显著增强PCR扩增的迅速度。。。。扩增产品具有3’-dA突出端，，，，，可直接用于TA克隆。。。。

Optimus? Hotstart Taq DNA聚合酶是一种立异型的类抗体手艺修饰热启动酶，，，，，该酶在室温下活性被完全关闭，，，，，依赖温度激活酶活性，，，，，可有用镌汰非特异性扩增，，，，，具有很是高的特异性。。。。扩增片断长度可达5 kb（简朴模板）。。。。延伸速率为2min/kb（70-75℃，，，，，简朴模板可达20s/kb）。。。。该酶具有5'→3'聚合酶活性，，，，，无3'→5'外切酶活性。。。。扩增产品具有3'-dA最后。。。。Optimus? Hotstart Taq DNA聚合酶接纳先进的生产手艺，，，，，动物源性DNA污染为零，，，，，稳固性更强，，，，，具有抗体法热启动酶不可相比的优势。。。。同时，，，，，预变性时间缩短至3分钟，，，，，事情效率比大大都化学修饰法热启动酶更高，，，，，是一款很是新颖、适用的产品。。。。

产品组成

Component	P2041	P2042	P2043	P2044
2× Optimus? Hotstart Taq Mix	1 ml	1 ml × 5	100 ml	500 ml
超纯水	1 ml	1 ml × 5	-	-

本产品分含系统中包括溴酚蓝、不含溴酚蓝两类。。。。系统中包括溴酚蓝的产品，，，，，PCR扩增产品可直接电泳检测。。。。这两类产品的扩增性能无差别。。。。如无特殊说明提供系统中包括溴酚蓝的包装。。。。

生涯条件

-20℃生涯2年。。。。

质量控制

纯度检测：经质量检测，，，，，产品不含脱氧核糖核酸内切酶、脱氧核糖核酸外切酶和核糖核酸酶污染。。。。

功效检测：PCR要领检测无宿主剩余DNA，，，，，能有用扩增人基因组中的单拷贝基因。。。。

应用举例

1. 配制反应系统

请于冰上设置反应系统，，，，，系统巨细与组分用量与添加顺序可调解：

Ordinal	Component	Volume (50 μl reaction volume)	Final concentration (50 μl reaction volume)
1	2× Optimus? Hotstart Taq Mix	25 μl	1×
2	upstream primer (10 μM)^[1]	2 μl	0.4 μM
3	downstream primer (10 μM)^[1]	2 μl	0.4 μM
4	template DNA^[2]	1-4 μl	<1μg
5	超纯水^[3]	To 50 μl	-
optional	MgCl₂(MgSO₄)/PCR Enhancer^[4]	Variable	-

[1] 引物终浓度建议规模：0.1-1 μM。。。。特异性差时可降低浓度，，，，，效率低时可提高浓度。。。。

[2] 差别模板最佳用量差别，，，，，部分DNA模板建议用量如下表（50 μl反应系统）。。。。

Template	人类基因组DNA	λDNA	大肠杆菌基因组DNA	质粒DNA
Dosage	0.1μg-1μg	0.5ng-5ng	10ng-100ng	0.1ng-10ng

[3] 可单独订购超纯水（Cat. #：P9021/P9022/P9023）。。。。

[4] 可单独订购25mM MgCl₂（Cat. #：P9031）和PCR Enhancer（Cat. #：P9041）。。。。

2. 设定反应程序举行PCR反应

Stage	Temperature	Time	Number of Cycles
Initial Denaturation	94℃	3 min	1
Denaturation	94℃	30 sec	25-35
Annealing	55-68℃^[1]	30 sec
Extension	72℃	Variable^[2]
Final Extension	72℃	5-10 min	1

[1] 退火温度应凭证Tm值较低的引物来设。。。。

[2] 延伸时间按2min/kb来设最佳（简朴模板可达20s/kb）。。。。

3. 剖析效果

反应产品可直接举行琼脂糖凝胶电泳，，，，，通过凝胶成像装备视察目的条带的扩增情形。。。。若有需要，，，，，可举行割胶接纳。。。。

无产品或产品量少的刷新步伐有：1调解退火温度；；；；2镌汰抑制剂的影响，，，，，如提取的基因组DNA中含有抑制扩增的因素，，，，，需要高倍稀释（1: 10000）后使用；；；；3接纳乙醇沉降洗脱，，，，，提高模板DNA的纯度；；；；4使用PCR添加剂，，，，，如PCR Enhancer（Cat. #：P9041）、MgCl₂（Cat. #：P9031）等可提高产量。。。。

操作注重事项

1 本产品接纳刷新的类抗体修饰手艺，，，，，依赖温度激活DNA聚合酶，，，，，能有用抑制非特异性连系，，，，，可在室温下设置反应系统。。。。

2 Hotstart Taq DNA聚合酶具有脱氧核苷酸转移酶活性，，，，，因此在PCR产品3'最后通；；；；峒由1个多余的脱氧腺嘌呤核苷，，，，，可直接用于TA克隆。。。。

引物设计注重事项

引物长度一样平常在15-30个碱基之间；；；；上下游引物3’最后阻止互补，，，，，阻止泛起3个以上重复的G或C，，，，，或泛起发夹结构，，，，，不然会爆发非特异性扩增；；；；GC含量控制在40-60%，，，，，且上下游引物GC含量只管靠近；；；；Tm值控制在55-65℃之间，，，，，且上下游引物Tm值只管靠近，，，，，特殊附加序列（酶切位点、修饰等）是非模板匹配序列，，，，，不加入Tm值盘算。。。。

相关产品

名称	货号	规格
PCR Mix	P2011/P2012/P2013/P2014/P2015	1ml/5ml/10ml/50ml/100ml
Power Green qPCR Mix	P2101/P2102/P2103/P2104/P2105	1ml/5ml/10ml/50ml/100ml
1kb ladder	M1181/M1182	50次/250次
DS^TM5000	M1111/M1112	60次/300次
高纯度质粒小提试剂盒	N1011/N1012/N1013	50次/100次/200次
通用RNA提取试剂盒	R1051	50次
基因组DNA快速提取试剂盒	N1111/N1112	50次/100次
DNA凝胶接纳试剂盒	N1071/N1072/N1073	50次/100次/200次
RT-PCR Kit	R1011/R1012	20次/100次